服務(wù)熱線(xiàn)
400-021-2021
您的位置：首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 細胞分類(lèi) > 人臍靜脈細胞 > iCell-h110人臍靜脈內皮細胞HUVEC
產(chǎn)品中心
-
產(chǎn)品名稱(chēng)：
人臍靜脈內皮細胞HUVEC
產(chǎn)品型號： iCell-h110產(chǎn)品時(shí)間： 2024-08-05描述：人臍靜脈內皮細胞HUVEC來(lái)源于人靜脈內皮，可在半固體培養基中形成克隆，在免疫抑制小鼠中不能形成腫瘤。
產(chǎn)品介紹
人臍靜脈內皮細胞HUVEC介紹
人臍靜脈細胞HUVEC來(lái)源于人靜脈內皮，可在半固體培養基中形成克隆，在免疫抑制小鼠中不能形成腫瘤。
一、細胞特性
?。?）來(lái)源：人臍帶組織
?。?）形態(tài)：內皮細胞樣貼壁生長(cháng)
?。?）含量：>1x10^6 細胞數
?。?）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
?。?）用途：僅供科研使用。
二、運輸和保存
1、干冰運輸及復蘇好存活細胞
?。?）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
?。?）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
2、細胞接收后的處理
?。?）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
?。?）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
?。?）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的wan全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
?。?）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的wan全培養基來(lái)培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
人臍靜脈內皮細胞HUVEC 鏡像綺點(diǎn)（iCell）
三、培養基及培養凍存條件準備：
1、準備內皮細胞培養體系（推薦：PriMed-iCell-002）
?。?）內皮細胞培養基礎培養基：93%
?。?）胎牛血清（FBS）：5%
?。?）內皮細胞培養添加劑：1%
?。?）青mei素/鏈mei素，P/S：1%
2、培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
四、細胞處理：
1、凍存細胞的復蘇：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mLwan全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，wan全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8mlwan全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
3、對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
?。?）棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
?。?）加入0.25％（w / v）yi蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10?S的培養基來(lái)終止消化。
4、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的wan全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
5、細胞凍存：收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
下面T25瓶為例；
1、細胞凍存時(shí)按照細胞傳代的過(guò)程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來(lái)決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個(gè)活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(gè)活細胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱(chēng)、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過(guò)夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
五、注意事項
1、收到細胞后，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2、收到細胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(shí)（視細胞密度而定）穩定細胞狀態(tài)。接著(zhù)在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收細胞時(shí)就整體外觀(guān)拍一張照片，觀(guān)察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀(guān)察記錄細胞在運輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據。
3、由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶(hù)收到細胞后一周內的細胞狀態(tài)，故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4、所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
相關(guān)產(chǎn)品
-
沒(méi)有相關(guān)產(chǎn)品信息...
- (上一篇)：PriMed-iCell-003人皮膚成纖維HSF
- (下一篇)：SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞