您的位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 細胞分類(lèi) > 細胞系 > SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞
產(chǎn)品中心
人神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y/STR鑒定介紹
SH-SY5Y是1970年建自骨瘤轉移灶的神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH細胞系經(jīng)三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。SH-SY5Y細胞的飽和密度大于1X106細胞/cm2。
人神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y/STR鑒定特性
(1)來(lái)源:腦神經(jīng)母細胞瘤,轉移部位骨髓
(2)形態(tài):上皮細胞樣,半貼壁生長(cháng)
(3)含量:>1x106個(gè)/mL
(4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
(5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
?。?)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
?。?)存活細胞,收到后應繼續生長(cháng),傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
?。?)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)(iCell)用途:僅供科研使用。
細胞接收后的處理:
(1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
(2)請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
(3)T25瓶中的培養基取出離心后,去上清,添加6ml新的*培養基,重新加入原T25培養瓶。
(4)如果細胞長(cháng)滿(mǎn)90%請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代,傳代培養用本公司附帶的*培養基。
(5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時(shí)與我們取得聯(lián)系。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
(1)準備MEM/F-12(1:1)培養基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
(2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
(3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:
(1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養,補加培養基至6ml。
(2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
1、將上清取出,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
3、輕輕打勻后吸出,和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養液后吹勻。
4、將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。
注:次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶(hù)需要自己決定。
(3)細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。
下面T25瓶為類(lèi);
1、細胞凍存時(shí),取出上清,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2、4min1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3、將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細胞服務(wù):
各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實(shí)驗外包服務(wù)
二、細胞系服務(wù):
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)
細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導
細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等
三、iPS細胞服務(wù):
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無(wú)滋養層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習
新藥及實(shí)驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶(hù)定制服務(wù)等