人臍靜脈細胞HUVEC是如何培育而來(lái)的？

　　人臍靜脈細胞HUVEC采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過(guò)內皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。人臍靜脈內皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

　　人人臍靜脈細胞HUVEC分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用。臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結構，臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細血管，與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤(pán)，臍靜脈將O2和營(yíng)養物質(zhì)從胎盤(pán)運送給胎兒。

 

　　對于貼壁人臍靜脈細胞HUVEC，傳代可參考以下方法：

　　1、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2、加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

　　3、按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

　　4、收到細胞后傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。