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人神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y是一種常用的神經(jīng)元樣細胞系,廣泛應用于神經(jīng)科學(xué)和藥理學(xué)研究中。這些細胞來(lái)源于兒茶酚能神經(jīng)系統中的腫瘤組織,并具有類(lèi)似原代人類(lèi)交感神經(jīng)節或中樞神經(jīng)系統(CNS)前列腺素E受體表達的功能。
包括兩種類(lèi)型的細胞,主要的是小的神經(jīng)母細胞樣的細胞,另一種是大的透明成纖維細胞。細胞提交到ATCC時(shí)已經(jīng)傳到第36代。已經(jīng)證明細胞可以傳代培養到80代以上。
細胞中的黑點(diǎn),是經(jīng)常有的事情,并不是細胞不夠好,也不是滅菌技術(shù)部過(guò)關(guān),有些是細胞本身帶的,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細胞間的,還有就是血清和培養基,主要分以下幾種情況:
1、如果人神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y小黑點(diǎn)有增殖趨勢,則有可能是細菌、真菌或支原體污染,需要處理。
2、如果小黑點(diǎn)沒(méi)有增殖趨勢,且不影響細胞生長(cháng),也不影響實(shí)驗的話(huà),則可能有以下情況:
?。?)是“黑膠蟲(chóng)”,
?。?)是核糖體,也可能是雜質(zhì)3)是細胞碎片,或血清中的里德沉淀析出,在做布朗運動(dòng)。
處理人神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y細胞黑點(diǎn)的一些好的意見(jiàn):
換好一點(diǎn)的血清;如果是貼壁細胞的話(huà),可用無(wú)菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話(huà),就不太好處理,可以向其中少加一點(diǎn)滋養細胞(從小鼠腹腔內取的巨噬細胞,這種細胞不分裂,過(guò)一陣就死掉了,)。
加滋養細胞對有黑膠蟲(chóng)的剛復蘇的細胞很有效!還有就是實(shí)驗環(huán)境要注意好,保持細胞間整個(gè)環(huán)境的潔凈度;
換用進(jìn)口的一次性塑料培養瓶;建議清理無(wú)菌室所有物品,在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養液,堅持天天洗,傳代時(shí)加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,一段時(shí)間后,蟲(chóng)子就會(huì )大大減少,對細胞的生長(cháng)也不會(huì )有大的影響;有材料具有一定的作用,可以和換液結合起來(lái)使用。
SH-SY5Y 細胞在以下領(lǐng)域得到了廣泛應用:
1、神經(jīng)退行性疾?。簩εcAlzheimer's和Parkinson's等重要的老年性的反應模型進(jìn)行基礎醫學(xué)方面 大量使用該類(lèi)型 的類(lèi)型
2、藥物篩選:SH-SY5Y細胞性質(zhì)適合評估許多化合物對CNS運動(dòng)、認知及情感相關(guān)處理之影響。因此,它們被視為開(kāi)發(fā)抑郁和焦慮治療方法等新藥物的關(guān)鍵工具。
3、分子生物學(xué)以及遺傳學(xué):作為易于操縱并進(jìn)行基因編輯(CRISPR/Cas9) 的均衡器,SH-SY5Y及其改進(jìn)品種可幫助我們設計解決特定催化劑機制問(wèn)題所需復雜的實(shí)驗條件。