人神經(jīng)上皮瘤細胞/STR鑒定

人神經(jīng)上皮瘤細胞/STR鑒定介紹

這株細胞與HTB-11都是神經(jīng)源的。1971年9月分離得到SK-N-MC后，發(fā)現它有中性多巴胺-β-羥化酶活性，也有細胞內兒茶酚胺，用甲醛可以誘導出熒光。

細胞特性

1） 來(lái)源：腦；眼眶上區神經(jīng)上皮瘤轉移灶

2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長(cháng)

3） 含量：>1x106

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長(cháng)，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染，請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途：僅供科研使用。

人神經(jīng)上皮瘤細胞/STR鑒定接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查發(fā)貨培養瓶的狀況，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2） 在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)時(shí)，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下，同時(shí)給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為細胞需要售后時(shí)提供收到細胞時(shí)細胞狀態(tài)的依據。

3） 觀(guān)察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。

4） 貼壁細胞：在運輸過(guò)程中貼壁細胞會(huì )有脫落的現象，如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長(cháng)，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。

5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基）。

6）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基來(lái)培養細胞。  收到細胞后di一次傳代建議1：2傳代 。

細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備MEM（推薦iCell-0012）培養基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注：di一次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶(hù)需要自己決定。

3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。

下面T25瓶為類(lèi)；

1，細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗一遍后加入1mlyi酶，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(diǎn)（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：

一、原代細胞服務(wù)
      各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源；
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
      原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等；
      原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗外包服務(wù)；

二、細胞株/系服務(wù)
      細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)；
      細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導；
      細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等；

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養（有滋養層or無(wú)滋養層在）；
      iPS細胞增殖及冷凍保存；
      iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習；
      新藥及實(shí)驗儀器上市前評估；

四、技術(shù)外包服務(wù)：各類(lèi)細胞生物學(xué)實(shí)驗、分子生物學(xué)實(shí)驗、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他：根據客戶(hù)需要定制服務(wù)等

• Toledo細胞Toledo 人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞
• NCI-H1417細胞NCI-H1417 人小細胞肺癌細胞 STR鑒定
• M-1細胞M-1 小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)/STR鑒定
• NCI-H2009細胞NCI-H2009 人肺腺癌細胞/STR鑒定
• AU565細胞AU565 人乳腺癌細胞/STR鑒定
• MUG-Chor1細胞MUG-Chor1 人骶骨脊索瘤細胞/STR鑒定
• U-Ch1細胞U-Ch1 人骶骨脊索瘤細胞/STR鑒定
• HCC1954細胞HCC1954 人乳腺導管癌細胞/STR鑒定
• NCI-H69 人小細胞肺癌細胞 STR鑒定
• KU-19-19 人膀胱移行細胞癌細胞