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15141133427您的位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 細胞分類(lèi) > 人腦膠質(zhì)瘤細胞系 > U87MG細胞U87MG人腦膠質(zhì)瘤細胞系/STR鑒定
產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
U87MG人腦膠質(zhì)瘤細胞系/STR鑒定
細胞特性
1) 來(lái)源:腦
2) 形態(tài):貼壁生長(cháng)
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續生長(cháng),傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。
U87MG人腦膠質(zhì)瘤細胞系/STR鑒定
接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養瓶的狀況,若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存,作為細胞需要售后時(shí)提供收到細胞時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3) 觀(guān)察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過(guò)程中貼壁細胞會(huì )有脫落的現象,如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長(cháng),可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基)。
6)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來(lái)培養細胞,請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后di一次傳代建議1:2傳代 。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM(推薦iCell-0001)培養基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注:di一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶(hù)需要自己決定。
細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):
一、原代細胞服務(wù)
各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等;
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗外包服務(wù);
二、細胞株/系服務(wù)
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū);
細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導;
細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等;
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無(wú)滋養層在);
iPS細胞增殖及冷凍保存;
iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習;
新藥及實(shí)驗儀器上市前評估;
四、技術(shù)外包服務(wù):各類(lèi)細胞生物學(xué)實(shí)驗、分子生物學(xué)實(shí)驗、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他:根據客戶(hù)需要定制服務(wù)等
序號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號 | 規格 | 售價(jià) | 備注 |
1 | 培養基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 | |
2 | 培養基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 | |
3 | 培養基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 | |
4 | 內皮細胞培養基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 | |
5 | 動(dòng)物上皮細胞培養基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 | |
6 | 上皮細胞培養基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 | |
7 | Mccoy’s 5A 培養基 | icell-0011 | 500ml | 160 | |
8 | MEM培養基 | icell-0012 | 500ml | 140 | |
9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 | |
10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 | |
11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 | |
12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 | |
13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 | |
14 | PS雙抗(進(jìn)口) | 15140-122 | 100ml | 452 | |
15 | yi蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
相關(guān)產(chǎn)品
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