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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
NALM-6 人B淋巴白血病細胞/STR鑒定介紹
該細胞由19歲患有急性淋巴細胞白血?。ˋLL)的19歲男子的外周血建立,在1976年復發(fā)。
細胞特性
1)來(lái)源:外周血
2) 形態(tài):懸浮生長(cháng)
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續生長(cháng),傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。
(3)具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的*培養基。
4) 如果細胞長(cháng)滿(mǎn)(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時(shí)與我們取得聯(lián)系。
NALM-6 人B淋巴白血病細胞/STR鑒定
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI Medium 1640 培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗,1%;
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
5.懸浮細胞的傳代
在傳代密度1 x 106 cells/ml,細胞可在維持在1.0-2.0 x 106 cells/ml的密度生長(cháng),傳代比例為1:2至1:3,三天一次,低的傳代密度為0.5 x 106cells/ml。(seed out at ca. 1 x 106 cells/ml; maintain at 1.0-2.0 x 106 cells/ml; split ratio of 1:2 to 1:3 every 3 days; minimum density of 0.5 x 106cells/ml)
細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
培養細胞時(shí)請注意
(1)傳代時(shí)細胞的接種密度應控制在 1萬(wàn)-4萬(wàn) 活細胞/平方厘米。
(2)選用高質(zhì)量的胎牛血清配制培養液。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細胞服務(wù):
各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實(shí)驗外包服務(wù)
二、細胞系服務(wù):
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)
細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導
細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等
三、iPS細胞服務(wù):
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無(wú)滋養層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習
新藥及實(shí)驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶(hù)定制服務(wù)等
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司
序號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號 | 規格 | 售價(jià) | 備注 |
1 | 培養基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培養基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培養基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 內皮細胞培養基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
|
5 | 動(dòng)物上皮細胞培養基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮細胞培養基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
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7 | Mccoy’s 5A 培養基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
|
8 | MEM培養基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
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10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
|
11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
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12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS雙抗(進(jìn)口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | 胰蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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相關(guān)產(chǎn)品
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