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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
人乳腺癌細胞MDA-MB-231介紹
該細胞系由CailleauR在1976年從一名48歲的患有轉移性乳腺癌的白人女性的心包滲出液中分離建立的。該細胞表達FGF的受體。
細胞特性
?。?)來(lái)源:乳腺癌
?。?)形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長(cháng)
?。?)含量:>1x106個(gè)/mL
?。?)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
?。?)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人乳腺癌細胞MDA-MB-231運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
?。?)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
?。?)存活細胞,收到后應繼續生長(cháng),傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
?。?)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
MDA-MB-453人乳腺癌細胞/STR鑒定用途:僅供科研使用。
細胞接受后的處理:
?。?)收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養瓶的狀況,若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
?。?)在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時(shí)給細胞拍照各2-3張(10×,20×都要拍照),作為售后的依據。
?。?)觀(guān)察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
?。?)貼壁細胞:在運輸過(guò)程中貼壁細胞會(huì )有脫落的現象,如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長(cháng),可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。
?。?)懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基)。
?。?)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來(lái)培養細胞,請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基來(lái)培養細胞。收到細胞后di一次傳代建議1:2傳代。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
?。?)準備L15(推薦iCell-0009)培養基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
?。?)培養條件:氣相:空氣,100%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
?。?)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:
?。?)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
?。?)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3、按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4、將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注:di一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶(hù)需要自己決定。
?。?)細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。
下面T25瓶為類(lèi);
1、細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2、4min1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3、將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細胞服務(wù):
各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實(shí)驗外包服務(wù)
二、細胞系服務(wù):
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)
細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導
細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等
三、iPS細胞服務(wù):
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無(wú)滋養層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習
新藥及實(shí)驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶(hù)定制服務(wù)等
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司
序號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號 | 規格 | 售價(jià) | 備注 |
1 | 培養基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培養基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培養基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 內皮細胞培養基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
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5 | 動(dòng)物上皮細胞培養基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮細胞培養基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
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7 | Mccoy’s 5A 培養基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
|
8 | MEM培養基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
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10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
|
11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
|
12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS雙抗(進(jìn)口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | 胰蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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相關(guān)產(chǎn)品
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