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產(chǎn)品中心
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產(chǎn)品名稱(chēng)：
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞/STR鑒定
產(chǎn)品型號： HK-2細胞產(chǎn)品時(shí)間： 2024-08-05描述：HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞/STR鑒定細胞介紹1） 來(lái)源：腎皮質(zhì)/近端小管2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長(cháng)3） 含量：>1x106 個(gè)/mL4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝6）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
產(chǎn)品介紹
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）介紹
1） 來(lái)源：腎皮質(zhì)/近端小管
2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長(cháng)
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長(cháng)，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染，請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞接受后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3） 棄去T25瓶中的培養基，添加6ml新的*培養基。
4） 如果細胞長(cháng)滿(mǎn)（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時(shí)與我們取得聯(lián)系。
細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備培養液Keratinocyte-SFM(Invitrogen,17005-042)
備注1：K-SFM(Invitrogen,17005-042)培養液包含兩個(gè)組份：基礎培養基1瓶（貨號10724-011）+生長(cháng)因子2管貨號（37000-015）
備注2：按照K-SFM培養基說(shuō)明書(shū)，需額外添加Gentamicin Solution。建議使用Gentamicin/Amphotericin Solution 500×（Gibco,R-015-10）。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：*培養液92.5%，7.5%DMSO，現用現配。
4）傳代比例：1:2或1:3
備注：如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細胞后的*次傳代一般是1:2。
傳代周期：4-6天
換液頻率：每周 2-3次
預期存活率 70%
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。
下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(diǎn)（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：
一、原代細胞服務(wù)
各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源；
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等；
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗外包服務(wù)；
二、細胞株/系服務(wù)
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)；
細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導；
細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等；
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養（有滋養層or無(wú)滋養層在）；
iPS細胞增殖及冷凍保存；
iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習；
新藥及實(shí)驗儀器上市前評估；
四、技術(shù)外包服務(wù)：各類(lèi)細胞生物學(xué)實(shí)驗、分子生物學(xué)實(shí)驗、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他：根據客戶(hù)需要定制服務(wù)等
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