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產(chǎn)品中心
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產(chǎn)品名稱(chēng)：
RAW264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
產(chǎn)品型號： RAW264.7細胞產(chǎn)品時(shí)間： 2024-08-05描述：RAW264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞細胞描述此細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點(diǎn)形成試驗陰性?？梢园嬛行约t并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。
產(chǎn)品介紹
RAW264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
細胞描述
此細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點(diǎn)形成試驗陰性?？梢园嬛行约t并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖?？梢钥贵w依賴(lài)性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導分解紅血球但對腫瘤靶細胞無(wú)作用。
細胞特性
1） 來(lái)源：鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；單核細胞；巨噬細胞
2） 形態(tài)：不規則圓形，紡錘狀，貼壁細胞，少量懸浮。
3） 含量：>1x10^6 細胞數
4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5） 用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）半貼細胞或貼壁不牢（懸?。┘毎篢25瓶置于37℃培養箱中約2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶(hù)需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完quan培養基重懸后打回到原培養瓶中繼續培養，若細胞生長(cháng)70%-90%對細胞進(jìn)行傳代，傳代時(shí)需要收集培養基中懸浮的細胞離心后回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完quan培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
RAW264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備DMEM(包含2mM L-谷an酰胺，0.11g / L丙tong酸鈉) (推薦iCell-0001)培養基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %；P/S青mei素-鏈mei素 1%。
2） 注意事項：
（a）在細胞生長(cháng)的初始階段，細胞以貼壁的形式生長(cháng)并呈現出長(cháng)方體的形態(tài)和有“偽足"延伸。隨著(zhù)培養時(shí)間的增加，細胞呈現圓形并以疊加的形式生長(cháng)。細胞密度達到一定的程度，會(huì )有細胞以懸浮的方式散落到到培養基中，鏡下觀(guān)察會(huì )發(fā)現懸浮和貼壁的細胞會(huì )同時(shí)出現。
（b）該細胞傳代時(shí)不需要用yi酶消化。傳代時(shí)，用無(wú)菌細胞刮刮拭培養表面將細胞刮落，收集離心后重懸接種到新的培養瓶中。
（c）該細胞形態(tài)上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形。當細胞密度較大時(shí)，細胞會(huì )輕微脫落變圓或者許多細胞堆積在一起，有些細胞甚至脫落漂浮。這些漂浮的細胞是存活的，在傳代時(shí)應收集起來(lái)，離心后細胞沉淀可以繼續培養。（d）血清質(zhì)量差異可能引起細胞貼壁能力變化，應選用高質(zhì)量的胎牛血清。
3） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
4） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1）凍存細胞的復蘇：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完quan培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完quan培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完quan培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：
該細胞用細胞刮鏟替代yi酶來(lái)對細胞進(jìn)行處理。用無(wú)菌細胞刮鏟刮拭細胞附著(zhù)培養表面將細胞刮落，收集細胞后離心去上清，重懸后接種到新的裝有新鮮培養液的培養瓶?jì)?。收貨后第一次傳?:2進(jìn)行，后續可以根據實(shí)際的情況以1:2~1:4的比例進(jìn)行傳代。
3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
下面T25瓶為例；
1. 1，細胞用細胞刮鏟替代yi酶來(lái)對細胞進(jìn)行處理。用無(wú)菌細胞刮鏟刮拭細胞附著(zhù)培養表面將細胞刮落，收集細胞。
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(gè)活細胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱(chēng)、代數、日期等信息。
將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過(guò)夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
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