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15141133427您的位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 細胞分類(lèi) > 細胞系 > MHCC-97H細胞MHCC-97H 人高轉移性肝癌細胞/STR鑒定
產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
MHCC-97H 人高轉移性肝癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)(iCell)介紹
來(lái)源于中山醫院,用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠,進(jìn)行3次肺轉移篩選,取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉移的肝癌細胞系
細胞特性
1) 來(lái)源:肝癌
2) 形態(tài):上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續生長(cháng),傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。
MHCC-97H 人高轉移性肝癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)(iCell)接受后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的*培養基。
4) 如果細胞長(cháng)滿(mǎn)(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時(shí)與我們取得聯(lián)系。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。
細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):
一、原代細胞服務(wù)
各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等;
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗外包服務(wù);
二、細胞株/系服務(wù)
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū);
細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導;
細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等;
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無(wú)滋養層在);
iPS細胞增殖及冷凍保存;
iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習;
新藥及實(shí)驗儀器上市前評估;
四、技術(shù)外包服務(wù):各類(lèi)細胞生物學(xué)實(shí)驗、分子生物學(xué)實(shí)驗、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他:根據客戶(hù)需要定制服務(wù)等
相關(guān)產(chǎn)品
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