小鼠小膠質(zhì)BV2使用小tips來(lái)了，請注意查收

　　小鼠小膠質(zhì)BV2是從小鼠腦小膠質(zhì)瘤中收集的，干冰運輸并轉移到液氮或-80度冰箱冷凍或收到后立即直接回收；存活的細胞在接收后應繼續生長(cháng)，當傳代達到良好的細胞生長(cháng)狀態(tài)時(shí)再進(jìn)行冷凍。收到后，請檢查是否有漏液。先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)，用酒精對瓶壁進(jìn)行消毒，將T25瓶在37℃培養2-3H左右。
 

　　離心后，除去上清液，加入6ml新的*培養基，重新加入原T25培養瓶。如果細胞長(cháng)到90%，請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代，傳代應使用完整培養基。半貼壁細胞會(huì )黏附在瓶底，但黏附不緊密。輕輕吸取培養基，輕輕吹打細胞表面，細胞表面不經(jīng)胰蛋白酶消化即脫落。推薦使用培養皿進(jìn)行培養，更適合吹細胞。
 

　　吹細胞時(shí)盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡，以免影響細胞狀態(tài)。下面是小鼠小膠質(zhì)BV2使用小tips，希望對你的使用會(huì )有所幫助。
 

　　1、小鼠小膠質(zhì)BV2呈半貼壁圓形或多角形，有的呈圓形懸浮狀。它們可以在傳代過(guò)程中收集和培養。更換溶液時(shí)，將懸浮的細胞離心收集，然后重新連接到原瓶中。如果貼壁細胞多，活性好，可以不用懸浮細胞；

　　2、細胞對胰蛋白酶敏感。胰蛋白酶消化后，細胞形狀會(huì )更加紡錘形并變得緊密，不建議通過(guò)胰蛋白酶消化；

　　3、細胞生長(cháng)快，培養基消耗快。在培養過(guò)程中密切注意細胞狀態(tài)。當密度高，培養液趨于變黃時(shí)，及時(shí)更換溶液，避免細胞狀態(tài)變差；

　　4、小鼠小膠質(zhì)BV2細胞冷凍后，取出上清，用PBS洗滌，然后加入1ml胰蛋白酶。待細胞變圓脫落后，加入1ml培養基終止消化，用血細胞計數板計數；

　　5、4min1000rpm離心去除上清液。加入1ml血清重懸細胞，根據細胞數加入血清和DMSO，輕輕混勻。DMSO終濃度為10%，細胞密度為1-2xe6/ml。每個(gè)冷凍保存管用1ml細胞懸液冷凍，注意凍存管的鑒別；

　　6、將凍存管放入程序冷卻箱內，放入-80℃冰箱，至少2小時(shí)后轉入液氮沖洗保存。記錄低溫恒溫器的位置以備下次檢索。