說(shuō)說(shuō)小鼠小膠質(zhì)BV2的傳代方法和凍存方法

　　小鼠小膠質(zhì)BV2是一個(gè)不斷增長(cháng)和分化的細胞群。由于其遺傳轉化，它具有無(wú)限的生長(cháng)潛力。體外培養的細胞系用于醫學(xué)或科學(xué)研究。事實(shí)上，連續細胞系可以在大量培養基中培養。隨著(zhù)代數的增加，細胞的基因型和表型可能會(huì )發(fā)生變化。保證細胞純度在90%以上，并通過(guò)微生物檢測，確保不含HIV、HBV、HCV、支原體、真菌等各類(lèi)細菌。

　　如果懸浮物來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水，簡(jiǎn)單的方法是用1000r/min低速離心10分鐘。如果懸浮液體積較大，可適當延長(cháng)離心時(shí)間，但速度不宜過(guò)高，延遲不宜過(guò)長(cháng)，以免擠壓或對細胞造成機械損傷。離心沉淀后，用無(wú)鈣無(wú)鎂PBS洗2次，培養基洗1次，調整合適的細胞濃度后，裝瓶培養。如果選擇懸浮液中的一些細胞，通常使用離心后的細胞分層液，因為由于各種細胞的比重不同，在離心后的分層液中可以形成不同的層，從而可以收獲靶細胞作為需要。

　　

　　一、小鼠小膠質(zhì)BV2傳代方法：

　　1、輕輕吸去培養上清液，留下2-3ml培養基，輕輕吹打細胞表面，吹掉細胞；

　　2、混勻細胞，收集細胞培養基，900rpm離心3-5分鐘，棄上清；

　　3、加入新的培養基，輕輕重懸細胞，均勻分布到新的培養瓶中；

　　4、補充完整培養基，將培養瓶放回培養箱進(jìn)行靜態(tài)培養。

 

　　二、小鼠小膠質(zhì)BV2凍存方法：

　　1、離心得到細胞沉淀后，加入配置好的凍存液，輕輕重懸細胞；

　　2、盡快將細胞懸液轉移到標記好的凍存管中；

　　3、將凍存管轉移到程序凍存箱中，放入-80℃冰箱過(guò)夜，次日轉移到液氮中保存；如果沒(méi)有凍存實(shí)驗室，可以在加入細胞后5-10分鐘將細胞置于4度的泡沫箱中。然后-20在2h保存，然后轉移到-80度過(guò)夜。第二天轉移到液氮中保存。