說(shuō)說(shuō)大鼠心肌細胞H9C2的分離方法和質(zhì)量檢測

　　大鼠心肌細胞H9C2是原始克隆細胞系的亞克隆，該細胞系從胚胎BD1X大鼠心臟組織獲得，并顯示出骨骼肌的許多特性。這個(gè)細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應。如果培養基中的血清濃度下降到1%，融合發(fā)生得很快。

　　大鼠心肌細胞H9C2分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi)，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜(房室瓣)，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營(yíng)養物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無(wú)機鹽、尿素和尿酸等)，使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀；細胞培養2h后開(kāi)始貼壁，呈梭形；到12h左右，細胞開(kāi)始伸出偽足，呈菱形、多角形；細胞分離培養48h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細胞會(huì )出現搏動(dòng)；心肌細胞為終末分化細胞，在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點(diǎn)，并具有自發(fā)性節律搏動(dòng)，且心肌細胞的培養具有簡(jiǎn)便、定量、重復性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養的心肌細胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調節，研究心肌細胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對其安全性進(jìn)行評價(jià)以及從培養的心肌細胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景，對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

　　普諾賽(Procell)實(shí)驗室分離的大鼠心肌細胞H9C2采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法，并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。普諾賽(Procell)實(shí)驗室分離的大鼠心肌細胞經(jīng)α-Sarcometricactin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。