人胚腎細胞293T細胞培養有哪些優(yōu)點(diǎn)？

　　人胚腎細胞293T是一種廣泛應用于分子生物學(xué)、基因工程和病毒學(xué)等領(lǐng)域的細胞系。它來(lái)源于人類(lèi)胚胎中的腎小管上皮細胞。

       人胚腎細胞293T細胞培養的優(yōu)點(diǎn)如下：

　　1、研究對象為活細胞

　　在實(shí)驗中，可以根據需要保持細胞活力，并且可以長(cháng)期監測、檢測甚至定量評估一些活細胞的狀況，包括活細胞的形狀、結構和生命活動(dòng)。

　　2、研究條件可以人為控制

　　pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)條件可根據實(shí)際需要人為控制。同時(shí)，可以應用化學(xué)、物理和生物因素作為實(shí)驗觀(guān)察的條件。這些因素也可以受到嚴格控制。

　　3、研究樣本能達到比較均一

　　經(jīng)過(guò)一定代數的細胞培養，得到的細胞系可以達到均一，屬于同一類(lèi)型的細胞。如有必要，可采用克隆等方法對細胞進(jìn)行純化。

　　4、研究?jì)热菀子谟^(guān)察、檢測和記錄

　　使用了各種研究技術(shù)，如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共聚焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等儀器設備。
 

　　人胚腎細胞293T培養操作流程：

　　1、培養基的制備及培養凍存條件：

　　1）準備RPMI-1640培養基（rpmi-1640：gibco，貨號21875-091），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清為10%。

　　2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度70%～80%。

　　3）冷凍保存液：90%血清，10%DMSO，現用現用，液氮保存。

　　2、細胞處理：

　　1）復蘇細胞：將含有1ml細胞懸液的凍存管放入37℃水浴中（水面應低于凍存管蓋），搖勻解凍，轉移至15ml離心管中，加入4ml培養基提前準備好，攪拌均勻。1000rpm離心4分鐘，棄上清，加入1ml培養基并吹勻。然后將所有細胞懸液轉移到含有5ml培養基的培養瓶中過(guò)夜培養。第二天，更換液體并檢查細胞密度。

　　2）人胚腎細胞293T細胞培養：細胞密度達到80%-90%即可培養。