人胚腎細胞293T接收后要做這些處理

　　人胚腎細胞293T是一種廣泛使用的細胞系，也被稱(chēng)為HEK 293T或293 cells。它最初由Frank Graham和Alex van der Eb于1977年在荷蘭萊頓大學(xué)建立。

　　這種細胞起源于人類(lèi)的胚胎腎小管上皮細胞，因此能夠表達許多與腎功能相關(guān)的基因和蛋白質(zhì)。293T細胞株可以通過(guò)無(wú)血清培養、懸浮培養以及有限制性酶消化等方法進(jìn)行傳代。
 

　　一、人胚腎細胞293T接收后要做這些處理：

　　1、收到細胞后，請檢查發(fā)貨培養瓶的狀況，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

　　2、在顯微鏡下確認人胚腎細胞293T生長(cháng)狀態(tài)時(shí)，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下，同時(shí)給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為細胞需要售后時(shí)提供收到細胞時(shí)細胞狀態(tài)的依據。

　　3、觀(guān)察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。

　　4、貼壁細胞：在運輸過(guò)程中貼壁細胞會(huì )有脫落的現象，如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長(cháng)，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。

　　5、懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的培養基）。

　　6、備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養人胚腎細胞293T，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的培養基來(lái)培養細胞。收到細胞后一次傳代建議1：2傳代。
 

　　二、具有以下特點(diǎn)：

　　1、高轉染效率：由于其雙倍體狀態(tài)，在轉染時(shí)比單倍體細 胞更容易接受外源DNA并表達。

　　2、容易獲取且穩定：相較其他已知能夠支持多次分裂生長(cháng)癌變標準株（如HeLa），293T不能連續無(wú)限度地 進(jìn)行傳代，所以不存在惡性增殖的風(fēng)險 ，但其仍然保持了高 度穩定性。

　　3、可應用于研究不同類(lèi)型病毒感染機理：由于其廣泛應用 于原代細 胞 文化中作為對照組，而新出現的病毒往往沒(méi)有可靠 的細胞系可以進(jìn)行繁殖，因此293T被用于在人類(lèi)細 胞中表達和復 制不同類(lèi)型的病毒。

　　4、適合制備慢病毒載體：由于其能夠高效地產(chǎn)生包含重組基 因的慢 病 毒，所以被廣泛應用于基因傳遞工具之一。