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肝癌并不陌生,那么
人肝癌細胞HEPG2是什么呢,大家可能對這個(gè)并不了解,為了自己和家人的健康,讓我們來(lái)了解一下它是什么吧。HEPG2來(lái)源于一個(gè)15歲白人的肝癌組織,該細胞分泌多種血漿蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。該細胞能大容量培養,乙肝表面抗原陰性,對G418有抗性,對人生長(cháng)激素有刺激反應。
1、細胞培養:人肝癌細胞HEPG2用含10%胎牛血清的高糖DMEM培養基,放人37℃恒溫、5%COZ孵化箱中培養。
2、分選SP細胞:重懸細胞于預熱的DMEM培養基中,濃度為1x109/L,加人Hoechst至終質(zhì)量濃度為5m留L,370C,90min孵育,對照組在Hoechst染色前加人終質(zhì)量濃度為50m擴L的維拉帕米,孵育結束后重懸細胞于冰的Hanks平衡鹽,同時(shí)加人2m剔LPI以區分壞死細胞,下面所有實(shí)驗都以經(jīng)流式細胞儀分選出的SP細胞為實(shí)驗組,對照組選取同代未經(jīng)分選的HepG2細胞。
3、非肥胖糖尿病/嚴重聯(lián)合免疫缺陷(NOD/SLID)鼠接種實(shí)驗:雄性NOD/SCID鼠(5周)每組各5只,經(jīng)分選所得SP細胞調整濃度至2x10'/L,對照組人肝癌細胞HEPG2調整濃度至2x106/L,分別將前述細胞懸液0.2ml注射于小鼠皮下,觀(guān)察成瘤情況,90d后處死小鼠,取皮下形成的腫瘤,比較其成瘤情況。