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人肝星形細胞LX2也稱(chēng)為liemingXu-2,是一個(gè)永生的細胞。細胞培養是細胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究和生物工程中的一項基本實(shí)驗技術(shù)。動(dòng)物細胞培養為疫苗的生產(chǎn),開(kāi)發(fā)以及腫瘤的預防和治療提供了一種新的方法。今天,我們總結了它的培養指南給你,你可要認真學(xué)好了。
體外培養的細胞可分為原代細胞和傳代細胞。原代細胞是指人體取出后立即培養的細胞。有人稱(chēng)代細胞和十代內的細胞為原代細胞培養,而在體外培養條件下適于連續繼代培養的細胞稱(chēng)為代細胞。分散的細胞懸液在培養瓶中迅速粘附在瓶壁上,這稱(chēng)為細胞粘附。一旦細胞附著(zhù)在壁上,它們便迅速散開(kāi)并開(kāi)始有絲分裂,并逐漸形成致密的細胞單層,稱(chēng)為單層細胞培養。
對于粘附的人肝星形細胞LX2,可以使用以下方法進(jìn)行傳代:
1.丟棄培養上清液,并用不含鈣和鎂離子的PBS潤濕細胞1-2次。
2.在培養瓶中加入2ml消化液,并在37℃的培養箱中消化1-2分鐘。然后觀(guān)察II型肺泡上皮細胞的消化|細胞在顯微鏡下。如果大多數細胞變成圓形并脫落,請迅速將其帶回手術(shù)臺,輕按培養瓶幾次,并添加少量培養基以停止消化。
3.添加6-8毫升/瓶培養基,輕輕拍打,然后將其吸出。以1000rpm離心4分鐘,棄去上清液,加入1-2ml培養基,然后充分吹掃。
4.按照1:2到1:5的比例將細胞懸液分成裝有8ml培養基的新板或瓶。
對于懸浮人肝星形細胞LX2,可以將以下方法用于傳代培養:
方法1:收集細胞,并以1000rpm離心4分鐘。棄去上清液,并加入1-2ml培養基。將細胞懸液按照1:2至1:5的比例分成含有8ml培養基的新板或瓶。
方法2:可以更改一半的介質(zhì)。丟棄一半培養基后,將剩余細胞懸浮。將細胞懸液按照1∶2至1∶3的比例分成含有8ml培養基的新板或瓶。